第三節(jié) 抗體法檢測LDL-R
《動脈粥樣硬化》
Felgines等在研究RICO鼠的肝載脂蛋白時報道了抗體法的應用。
用來源于牛腎皮質(zhì)的LDL-R免疫兔,,得到兔抗牛-LDL-R抗體,,離心法收集純化細胞膜蛋白,點樣于硝化纖維膜上,,于猝滅液中溫育1h,,以TTBS洗3次,加入稀釋的抗LDL-R抗體血清,,再溫育90min,,TTBS洗后,纖維膜用結(jié)合有辣根過氧化物酶的第二抗體羊抗兔-IgG溫育1h30min,,TTBS洗3次,,TBS洗1次,15min后用4-氯-1-奈酚和H2O2顯色,。
TTBS:Tris-HCL20mM,,pH7.5NaCl500mM,Tween200.05%;TBS:Tris-HCL20mM。pH7.5,,NaCl 500mM
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