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第二十章 低密度脂蛋白受體的檢測

《動脈粥樣硬化》

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  脂蛋白受體主要包括乳糜粒受體(CM-R)、極低密度脂蛋白受體(VLDL-R),、低密度脂蛋白受體(LDL-R),、高密度脂蛋白受體(HDL-R)和清道夫受體(scavenger receptor)等。脂蛋白受體的檢測與一般受體檢測方法的原理及操作基本類同,。目前研究最多,,應(yīng)用最廣的要屬LDL-R,其他脂蛋白受體如清道夫受體、VLDL-R等的檢測方法與LDL-R基本相似,,多采用125Ⅰ標(biāo)記的配體檢測或是3HTdR摻入法等,。本章以LDL-R為代表介紹脂蛋白的檢測方法。

  低密度脂蛋白受體(LDL-R)廣泛分布于人與動物的各種細(xì)胞和組織,,如肝細(xì)胞,,成纖維細(xì)胞,血管平滑肌細(xì)胞,,淋巴細(xì)胞,,單核細(xì)胞及腎上腺、卵巢等,。LDL-R是一種跨膜糖蛋白,,位于細(xì)胞表面被膜凹的漿膜部位。主要功能是參與LDL-R的代謝過程,,與含有ApoB100,、ApoE的LDL、β-VLDL等結(jié)合,,并內(nèi)吞入細(xì)胞,,LDL-R缺乏則導(dǎo)致血中膽固醇異常,。家族性高膽固醇血癥(FH)是LDL-R基因突變引起的LDL-R缺乏以致膽固醇異常的顯性遺傳性疾病,。其特征為血膽固醇顯著升高、黃色瘤和早發(fā)心肌梗塞,。人群中雜合子型FH(LDL-R減少)發(fā)生頻率為1/500,,純合子型FH(LDL-R缺乏)較少見,發(fā)生頻率約為1/1000000,,通常在兒童期即發(fā)生心肌梗塞,。FH的發(fā)病率在我國也是比較高的,因此LDL-R的檢測對于篩選人群中的FH患者及預(yù)防冠心病,、心肌梗塞等具有重要意義,。

  細(xì)胞表面的LDL-R的分析可通過以下幾種檢測方法進(jìn)行:檢測同位素或非同位素標(biāo)記的LDL與LDL-R的結(jié)合力(或率),推算受體最大結(jié)合濃度,,在限制性生長條件下檢測細(xì)胞分裂抑制率,。判斷LDL受體活性;用抗體直接測定LDL-R量或者對受體直接進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因圖譜分析,。

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